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1.初筛：

        （1）头孢西汀（30μg/片）与头孢西汀（30μg）/邻氯西林（200μg）。后者比前者的抑菌圈≥5mm即疑为ampc。

        （2）5种纸片筛选：马斯平、泰能、头孢西汀、头孢他啶与头孢他啶/克拉维酸。如头孢西汀≤18mm，对马斯平、泰能敏感即疑为产ampc，如头孢他啶与其酶抑制剂的抑菌圈≥5mm可能产esbls。

        2.确认试验（头孢西汀三维水相试验法）

        3.三维水相试验方法的改进

        （1）将标准菌株atcc 25922按常规药敏纸片k-b法操作均匀涂布于m-h平板上。

        （2）在m-h平板中心贴一片头孢西汀(30ug/片) 纸片，在距纸片边缘1cm处，用无菌手术刀片切3cm长度的小槽，将待测菌株的6个菌落接种于槽内(勿溢出槽外)，35℃孵育18-24h。

        （3）结果观察：若抑菌圈向内凹陷，即ampc酶阳性。

        ※三维水相试验方法的改进(m-h平板打孔[2mm]扩散法).

        4.质粒型ampc酶三联纸片方法的检测

        （1）将标准菌株atcc 25922按常规药敏纸片k-b法操作均匀涂布于m-h平板上。

        （2）在m-h平板中心贴一片头孢西汀(30ug/片) 纸片，在纸片边缘贴有待测菌的纸片（纸片上含20ul， ph8.0，1m tris-0.1medta）。

        （3）另一侧边缘贴有产ampc酶菌的纸片（同上）。

        （4）35℃孵育18-24h，如待检菌出现扁平或凹陷的抑菌环为阳性。

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