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单细胞基因组扩增有哪些好处
◇加入时间:2016-06-21 11:33:24  ◇当前新闻点击率:1721

研究人员通常会在下游分析中遭遇dna样本量有限或不足的问题。做为一种增加有限dna量的方法,全基因组扩增技术于1992年出现,该方法特别适于法医学鉴定和遗传疾病的研究,以及如二代测序技术和cgh阵列(比较基因组杂交)等新技术应用,后者的主要难题就在于dna样本数量有限,但分析需求量又很可观。单细胞基因组扩增优化了等温扩增的反应体系,可实现微量样本全基因组无差别扩增。

  使用高度续进性的phi29聚合酶得到的长dna片段确保了phi29扩增得到的dna覆盖了整个基因组,连贯并且无偏地扩增所有遗传位点。在有偏的研究中,使用mda、dop–pcr和pep技术对不同数量的基因组dna进行扩增(0.3–300 ng)。使用定量检测real-time pcr确定8个遗传位点相对的表达量。通过与1 µg未扩增的对照dna作比较,可以确定遗传位点的表达。由于未消除的二级结构会导致不同位点的不等同扩增,基于pcr的wga方法(比如dop–pcr或者pep)经常会导致遗传位点丢失。mda具有最好的dna扩增覆盖效果,并且将遗传位点丢失的风险降到了最低。

凯发平台app生产的这款全基因组扩增(whole genome amplification)是一种对全部基因组序列进行非选择性扩增的技术,其目的是在没有序列倾向性的前提下大幅度增加dna的总量。采用mda(多重链置换扩增)的方法,能够在16个小时之内,将ng甚至是pg级的微量dna有效扩增至10-40μg高覆盖度的全基因组dna。

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  这款全基因组扩增试剂盒已经把扩增后的产物进行二代测序,覆盖度能达到90%以上,各条染色体基因组的偏差基本一致;同时,我们随机选取了10个snp位点进行扩增,起始样本和扩增后的样本均有相应的特异性条带,基本没有差异。想了解更多的内容和资讯的话可以拨打免费电话:400-6656-888进行咨询。

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